93e congrès de l'American Association in Cancer Research

ARTICLE

Inhibiteurs d'angiogenèse

Malgré une certaine désillusion au niveau clinique, les inhibiteurs angiostatine et endostatine apparaissaient quand même sur une cinquantaine de posters. Parmi les résultats notables :

­ La production en continu sur 3 mois des inhibiteurs angiostatine ou endostatine après injection unique d'un vecteur adénoviral permet chez l'animal une réduction de 65 à 75 % des métastases pulmonaires dans le modèle du mélanome de type B16 [1].

­ Cette approche adénovirale d'expression d'endostatine est également efficace dans des xénogreffes d'une lignée cancéreuse colorectale humaine [2].

­ Par ailleurs, une formulation différente de l'endostatine permettant son injection par voie sous-cutanée a été testée avec succès chez le singe [3].

­ Une étude clinique sur 87 patients enregistre la cytokine IL6 mais écarte définitivement le VEGF et l'endostatine de la liste des facteurs pronostiques dans le cancer métastatique et hormono-résistant du sein [4].

Les étapes jouant un rôle potentiel ou certain au cours de l'angiogenèse tumorale sont bien évidemment attractives. Parmi ces étapes, le facteur de l'hypoxie HIF1alpha, facteur responsable de la transcription d'agents pro-angiogéniques [5], a fait l'objet d'une attention extrême : pas moins de 46 posters étudiaient sa régulation ou l'utilisaient comme révélateur. Parmi ceux-ci, quelques-uns retiennent plus particulièrement l'attention :

­ Une nouvelle cible du facteur HIF1alpha a été caractérisée [6]. Il s'agit de la maspine, ce suppresseur de tumeur dont l'absence a été associée au développement de certains cancers, tels que ceux du sein et de la prostate, et dont la régulation par méthylation vient très récemment d'être établie [7].

­ Une tentative d'explication à la surexpression du facteur HIF1alpha dans les tumeurs a été apportée par un groupe japonais qui a montré la présence de polymorphismes du gène de HIF1 dans les carcinomes à cellules squameuses de la tête et du cou [8].

Les sessions sur les inhibiteurs d'angiogenèse sont toujours porteuses d'espoir même si, à ce jour, les applications précliniques restent encore trop peu nombreuses. On peut citer le 2-méthoxy-œstradiol (2ME2), un métabolite endogène de l'œstradiol, qui a une activité antitumorale et anti-angiogénique reconnue depuis plusieurs années [9] mais dont le mécanisme d'action précis reste inconnu, même si l'inhibition de la polymérisation de la tubuline a pu être enregistrée. Le poster n° 902 indique pour la première fois que l'action de la 2ME2 passe par l'inhibition du facteur de l'hypoxie HIF1alpha [10]. La 2ME2, tout comme d'autres molécules actives sur la tubuline telles que le taxol ou la vincristine, est en fait capable in vitro d'inhiber l'activité transcriptionnelle de HIF1. C'est donc sans doute l'inhibition de HIF1alpha qui explique la chute de vascularisation enregistrée in vivo après traitement au 2ME2 de tumeurs humaines xénogreffées chez l'animal.

Apoptose

La voie d'inhibition de l'apoptose a fait l'objet de nombreuses présentations tant orales qu'écrites.

Dans les cancers dus à l'amiante, il avait été décrit une activation des récepteurs à l'EGF. Une étude britannique [11] indique à présent que l'activation de la voie des kinases de survie PI3Kinase --> Akt est un mécanisme par lequel des cellules mésothéliales peuvent échapper à la toxicité in vitro des fibres d'amiante.

Parmi les nouvelles techniques, le western array, un système à grande échelle de criblage protéique par immunovisualisation, a eu plusieurs résultats prometteurs. Le poster 1528 étudiait la carcinogenèse pulmonaire in vitro en comparant les profils protéiques obtenus dans une lignée épithéliale du poumon traitée ou non à l'aide d'un condensat de fumée de cigarettes. Les résultats ont montré que les kinases de survie PI3K, Akt et p70S6K étaient plus particulièrement affectées [12], orientant par là même des axes de recherche dans ce type de cancérogenèse.

Un groupe de Virginie [13] implique la voie de kinases de survie PI3K et Akt dans la résistance à l'étoposide chez des lignées pulmonaires à petites cellules, suggérant ainsi de tester en co-traitement les inhibiteurs de ces kinases dans ce type particulier de cancer du poumon.

Le rôle de la voie Akt dans la radiosensibilisation cellulaire semble désormais bien établi.

Ainsi, un groupe japonais travaillant sur les cholangiocarcinomes, un type de tumeur incurable et résistante aux interventions radio-thérapeutiques courantes, a noté que la kinase Akt active est retrouvée surexprimée dans la vaste majorité (85 %, 16 sur 19) des tumeurs réséquées [14]. Le blocage de cette voie de survie rend ce type de cellules sensibles aux radiations ionisantes [14].

Ailleurs, une étude [15] portant sur cinq lignées cancéreuses issues du tissu mammaire montre que le blocage de ces mêmes kinases de survie radiosensibilise les cellules.

Le groupe de P. Dennis du National Cancer Institute qui avait récemment enregistré [16] l'activation constitutive de la kinase Akt dans 16 des 17 lignées cancéreuses du poumon testées, montre à présent [17] que la nicotine et son dérivé carcinogène, le NNK, activent la kinase Akt, et donc la survie cellulaire, dans des cellules épithéliales normales. Cette survie peut ainsi participer au processus de la cancérogenèse pulmonaire due au tabac par la non-élimination des cellules dont celles ayant accumulé des mutations génétiques induites par les composants nocifs de la fumée. Le même phénomène pourrait bien être généralisable à tous les cancers liés au tabac.

L'inhibiteur du protéasome PS341, qui avait fait son apparition 6 mois auparavant [18], faisait l'objet de 14 posters. Parmi eux, une étude précisait que ce dérivé dipeptidique de l'acide boronique était capable d'inhiber 4 des 6 lignées cancéreuses pancréatiques humaines testées, les deux résistantes surexprimant une des protéines anti-apoptotiques (Bcl2 ou BclxL). In vivo, la croissance tumorale et l'angiogenèse sont inhibées par le traitement au PS341 d'animaux xénogreffés à l'aide de l'une ou l'autre type de lignées pancréatiques [19].

Petites molécules

Des 17 résumés mentionnant le flavopiridol et ses dérivés, il ressortait entre autres qu'utilisé seul ou en combinaison, il constitue un très bon inducteur d'apoptose. Ainsi :

­ il induit fortement l'apoptose dans des cellules issues de cancers de la tête et du cou [20] ;

­ il augmente les effets du depsipeptide dans des cellules cancéreuses du poumon ou de l'œsophage [21] ;

­ il synergise dans des cellules leucémiques humaines les effets des bloqueurs de la PI3 kinase [22] ou des inhibiteurs de l'activité histone déacétylase [23].

Mais le flavopiridol est aussi un très bon agent radiosensibilisant des gliomes [24, 25].

Parmi les dizaines de petites molécules inhibitrices, celles agissant sur la GTPase Ras peuvent se révéler d'une redoutable efficacité. En effet, Ras étant retrouvée mutée dans 30 % des cancers tous types confondus (et jusqu'à 80 % dans certains cancers), sa régulation a depuis longtemps été étudiée avec précision. L'addition sur la molécule Ras d'un groupement farnésylé constituant une modification post-traductionnelle nécessaire à son activation, plusieurs inhibiteurs de l'activité farnésyltranférase ont été testés récemment. Une étude française sur une lignée du cancer du poumon non à petites cellules comparait in vitro l'efficacité de plusieurs d'entre eux avec des agents endommageant l'ADN [26].

Un rapport final d'étude de phases I-II était présenté avec l'inhibiteur SCH66336 (lonafarnib) sur des patients souffrant de cancer du poumon dit non à petites cellules et résistants au traitement par le taxane [27]. Les études précliniques avaient montré que le lonafarnib était disponible oralement. Cette étude indique que 58 % des patients taxane-résistants (18 sur 33) répondent de manière positive à ce composé.

Le même composé SCH66336 montre in vitro sa bonne efficacité sur des cellules ayant la translocation BCR-ABL mais résistantes à l'inhibiteur STI571, ce qui offre peut-être une nouvelle opportunité de traitement dans certains cas de leucémies myéloïdes chroniques [28]. Les résultats concernant les dernières avancées sur le STI571 sont parus dans notre numéro de juin [29].

Techniques nouvelles

Côté techniques nouvelles, un système d'imagerie du petit animal retenait l'attention puisqu'il permettait d'enregistrer pour la première fois sur plusieurs semaines l'évolution de l'hypoxie au sein d'une tumeur grâce à une technique de microscopie confocale à fluorescence [30].

Un vecteur d'expression génique a été spécifiquement visualisé par un autre système d'imagerie non invasive, ce qui permet de suivre au cours du temps la production du facteur de croissance angiogénique VEGF au niveau même de la xénogreffe [31].

Ailleurs, le marquage de l'angiostatine et de l'endostatine, deux inhibiteurs de l'angiogenèse tumorale, à l'aide de technetium 99 a permis de suivre par imagerie chez l'animal l'évolution de la tumeur ainsi que l'efficacité du traitement anti-angiogénique [32].

Il est certain que toutes ces techniques sur le petit animal sont et seront d'un apport précieux pour l'analyse spatio-temporelle de l'action de telle ou telle nouvelle molécule en test préclinique.

Récepteurs à l'EGF

Dans le domaine en plein renouveau des récepteurs à l'EGF, près de 200 posters étaient présentés dans plusieurs sessions. En effet, les preuves s'accumulent quant au rôle de la dérégulation de la famille des récepteurs à l'EGF dans la pathogenèse de nombreuses tumeurs humaines.

Le groupe de Clinton à Portland a été pionnier [33] dans la caractérisation de l'herstatine, un transcrit naturel et partiel du domaine extracellulaire de HER2/ErbB2 qui, en se fixant directement aux récepteurs endogènes HER2/ErbB2 et EGFR, bloque leur signalisation. À présent, leur communication [34] caractérisait la forte inhibition induite par l'herstatine purifiée sur plusieurs lignées carcinomateuses humaines comme étant de type apoptotique et spécifique de la surexpression de HER2/ErbB2 ou EGFR. Utilisée seule, l'herstatine apparaissait même plus efficace que le trastuzumab, l'anticorps inhibiteur de HER2 déjà utilisé en clinique.

Ailleurs, le même HER2/ErbB2 est ciblé avec un certain succès par un adénovirus recombinant de type 5 exprimant une forme de ErbB2 défectueuse pour l'activité kinase et directement injectée dans la tumeur animale [35].

Afin de comprendre la différence qui existe à l'échelle moléculaire entre des tumeurs prostatiques androgène-dépendantes et androgène-indépendantes, un groupe de Taïwan a établi que des lignées cellulaires indépendantes des androgènes semblent exprimer, entre autres, davantage de protéines anti-apoptotiques Bcl2 et de récepteur à l'EGF, alors que l'absence d'inhibiteurs du cycle cellulaire comme p21/Cip1 et p27/Kip1 semble être caractéristique du phénotype dépendant des androgènes [36]. Si cette différence s'avère généralisable in vivo, elle pourrait dans le futur permettre de préciser le diagnostic et d'orienter le traitement en conséquence.

Un groupe de Chicago a apporté, grâce à des modèles in vitro mais aussi in vivo chez l'animal, la première preuve expérimentale que le mécanisme de résistance/induction par le tamoxifène est directement lié aux niveaux des récepteurs aux œstrogènes et HER2/neu [37].

Techniquement, il est intéressant de souligner qu'un système automatique de détection immuno-histochimique du récepteur à l'EGF à partir de pièces chirurgicales fixées et paraffinées a été perfectionné [38]

Enfin, dans le domaine général de la thérapie moléculaire ciblée visant les récepteurs à l'EGF, un résultat est à noter, celui obtenu par une équipe de la Duke University dans la Caroline du Nord [39] qui a déterminé, par la technique de RT-PCR en temps réel, le niveau des transcrits d'ARN correspondants aux récepteurs à l'EGF normal et muté dans 50 tumeurs neurales (allant du glioblastome multiforme à l'astrocytome et à l'oligodendrogliome), première étape vers un ajustement du traitement anti-EGF pour chaque tumeur.

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