Résumé : Les endothélines (ET1, ET2, ET3) sont des peptides exerçant des effets vasoactifs et mitogènes. Leur action est relayée par deux récepteurs : ETA (liant spécifiquement ET1) et ETB (liant ET1, ET2 et ET3). ET1 stimule la prolifération des cellules myométriales humaines en culture via des récepteurs ETA. Nous avons mis en évidence par RT-PCR la présence des transcrits des récepteurs ETA et ETB dans les léiomyomes intramuraux et dans les myomètres sains prélevés à distance des léiomyomes. Quatre transcrits des récepteurs ETA ont été identifiés mais un seul coderait pour une protéine réceptrice douée de propriétés de liaison. Le niveau d’expression des transcrits des récepteurs ETB est supérieur dans le myomètre sain en regard du léiomyome. Une étude pharmacologique complémentaire nous a permis de montrer que les récepteurs ETA prédominent dans le myomètre sain (75 % des récepteurs totaux). Dans les léiomyomes, seuls des récepteurs ETA, fonctionnels en termes de liaison, sont présents malgré la présence des transcrits des deux types de récepteurs. Les propriétés « facteur de croissance » de ET1 suggèrent un rôle potentiel pour ce peptide dans le développement tumoral du muscle lisse utérin humain.
Figure 1. Effet de l'endothéline
1 (ET1) sur l'incorporation de [3H] thymidine (A) et sur la prolifération
(B) des cellules myométriales humaines en culture. Les cellules
quiescentes (50 000 cellules/puits) sont incubées en l'absence ou
en présence de concentrations croissantes de ET1 ou en présence
de 10 % de sérum de veau fœtal (SVF). L'incorporation basale
de [3H] thymidine (100 % = témoin) est de 3 688 ±
787 dpm/puits. Les résultats sont exprimés en pourcentage
du témoin et représentent la moyenne ± SE de six expériences
indépendantes réalisées en quadruple.
* p < 0,01 versus le contrôle.
Figure 2. Action des antagonistes
des récepteurs des endothélines sur l'augmentation de l'incorporation
de [3H] thymidine induite par ET1 (100 nM) dans les cellules
myométriales. Les résultats représentent la moyenne
± SE de trois expériences indépendantes réalisées
en quadruple.
* p < 0,01 : différence significative par rapport au témoin.
+ p < 0,01 : différence significative avec les valeurs obtenues
en présence de ET1.
Figure 3. Expression des transcrits des
récepteurs ETA (I), des récepteurs ETB
(II) et de laß2-microglobuline (III) dans les échantillons
de léiomyomes (1, 2, 3) et de tissu myométrial sain correspondant
(respectivement 1', 2', 3'). Les produits obtenus après RT-PCR
sont analysés par migration électrophorétique sur gel
d'agarose coloré au bromure d'éthidium (IA, II, III) et par
hybridation après Southern-blot avec des sondes oligonucléotidiques
internes spécifiques (IB). La taille des fragments amplifiés
est indiquée en nombre de paires de bases (pb).
Figure 4. Représentation
graphique selon Scatchard de la liaison de [125I]ET1 à
ses récepteurs dans le léiomyome et le myomètre sain
apparié. Les résultats représentent une expérience
type réalisée en double. Des données similaires ont
été obtenues lors de six séries d'expériences
indépendantes réalisées chez six patientes différentes.
Figure 5. Inhibition de la
liaison spécifique de [125I]ET1 par différents
agonistes et antagonistes dans le léiomyome et le myomètre
sain correspondant. Les fractions membranaires sont incubées
en présence de [125I]ET1 (30 pM) et de concentrations
croissantes de ET1, S6c et FR139317. La liaison est exprimée en pourcentage
de la liaison spécifique en l'absence de compétiteur. Les
résultats sont représentatifs de trois expériences
indépendantes réalisées en double chez trois patientes
différentes.
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