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Journal de Pharmacie Clinique

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Méthode de dosage simultané de quatre antiprotéases par chromatographie liquide haute performance dans le plasma humain Volume 19, numéro 1, Mars 2000

Auteurs
Laboratoire de pharmacocinétique, Service de pharmacologie clinique, Assistance publique des hôpitaux de Paris, hôpital Pitié-Salpêtrière, 47-83, boulevard de l’Hôpital, 75634 Paris Cedex 13

Une nouvelle méthode par chromatographie liquide haute performance (CLHP) a été développée pour la détermination simultanée de l’indinavir, du nelfinavir, du ritonavir et du saquinavir, à partir d’un échantillon de 1 ml de plasma. Une extraction liquide/liquide a été couplée à une séparation chromatographique en phase inverse. Deux colonnes phényl (100 x 4,6 mm, 250 x 4,6 mm) sont reliées par l’intermédiaire d’un commutateur de vanne. La phase mobile est composée d’acétonitrile et d’un tampon phosphate à 0,03 M (55/45). La détection est réalisée en spectrométrie UV aux longueurs d’onde de 240 nm pour le ritonavir et le saquinavir, et 261 nm pour l’indinavir et le nelfinavir. Les droites d’étalonnage sont linéaires entre 0,5 et 20 mg/ml pour le ritonavir, 0,005 et 1 mg/ml pour le saquinavir, 0,05 et 10 mg/ml pour l’indinavir et le nelfinavir. Les coefficients de corrélation sont supérieurs à 0,998 pour tous les composés, avec des coefficients de variation de reproductibilité et de répétabilité inférieurs à 10 %. La méthode est spécifique et sensible et permet un suivi thérapeutique de patients traités par des antiprotéases quelles qu’elles soient.