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Les puces à ADN |
Annales de Biologie Clinique. Volume 58, Numéro 1, 29-38, Janvier - Février 2000, Revues générales
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 Article gratuit
 Summary
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Auteur(s) : M. Delpech |
Résumé : Les puces à ADN représentent une miniaturisation du classique système de reverse dot-blot. Elles sont constituées d’un support de petite taille, en plastique, en verre ou en silicium, sur lequel sont synthétisées ou greffées des sondes. Il est ainsi possible de fixer quelques milliers, voire une centaine de milliers de sondes par centimètre carré. En pratique les puces sont hybridées avec l’acide nucléique à étudier, préalablement amplifié par PCR, et marqué, en général par un fluorochrome, soit au cours de l’amplification, soit après l’hybridation. Après lavage, les hybrides sont repérés avec un système, le plus souvent composé d’un laser et d’un microscope confocal, couplé à un ordinateur, mais les variantes sont très nombreuses. Il est ainsi possible d’analyser en même temps un nombre considérable de séquences. Les applications en diagnostic n’en sont qu’au stade de prototypes. À terme les puces devraient permettre de mettre en évidence n’importe quelle mutation ponctuelle, d’effectuer en un temps très court la recherche des bactéries, virus ou parasites sans culture préalable. Elles devraient aussi permettre toutes sortes de typages, des agents infectieux aux groupes HLA et s’avérer un outil particulièrement puissant dans la recherche de nouveaux médicaments et dans la mise en évidence de leur toxicité. Un marché potentiel considérable est aussi le diagnostic de prédisposition, aussi bien aux maladies polygéniques qu’à une sensibilité particulière vis-à-vis de n’importe quelle substance chimique. Les applications des puces n’en sont qu’à leur début. L’évolution prévisible devrait permettre de se dispenser de l’amplification préalable des acides nucléiques à étudier, et on peut espérer à terme disposer de systèmes intégrés autonomes très économiques. La technologie pourrait enfin s’étendre à d’autres domaines que la biologie moléculaire et concerner par exemple l’immunologie ou la biochimie. |
Mots-clés : Puce à ADN – Génétique moléculaire – Séquençage d’ADN – Analyse de polymorphismes. |
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