Résumé : Les méthodes de biologie moléculaire, en étant capables de détecter quelques copies de génome, permettent de déterminer de nouveaux paramètres pour répondre aux objectifs de la virologie quotidienne moderne de diagnostic, de pronostic, de mesure de la charge virale et de détection des résistances aux antiviraux en complément ou en association avec la culture cellulaire et la recherche des antigènes et des anticorps. Les techniques, basées sur la connaissance des génomes et de la réplication intracellulaire des virus et sur l'utilisation des outils du génie génétique, comportent l'hybridation moléculaire (dot-blot, southern-blot, hybridation en phase liquide, hybridation in situ), l'amplification enzymatique (PCR, PCR nichée, RT-PCR, NASBA, ADNb, PCR in situ, PCR multiplex), la quantification des génomes (PCR ou RT-PCR quantitative, NASBA, ADNb) et le génotypage (types viraux, mutants, variants). La révélation des fragments génomiques extraits, natifs ou amplifiés avec un nucléotide marqué (dUTP biotine ou dUTP digoxigénine), est effectuée par électrophorèse en gel suivie d'hybridation ou en microplaques par test colorimétrique enzymatique ou en biochimioluminescence. |
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