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Annales de Biologie Clinique

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Standardisation et automatisation du typage HLA B27 par une technique cytofluorométrique : validation par comparaison à la microlymphocytotoxicité Volume 58, numéro 4, Juillet - Août 2000

Auteurs
Laboratoire d’immunologie, Centre hospitalier Lyon-Sud

L’association entre l’antigène HLA B27 et la spondylarthrite ankylosante constitue un des plus forts liens connus entre un phénotype HLA et une pathologie. Les techniques de référence utilisées pour le typage de l’antigène HLA B27 ne sont pas adaptées à l’activité de routine d’un laboratoire d’immunologie biologique. L’utilisation de la cytofluorimétrie est une alternative performante, mais elle implique une importante phase de validation propre à chaque laboratoire. Nous avons développé une technique de cytofluorimétrie la plus standardisée possible : sang total, lyse automatique, réglage automatique du photomultiplicateur et définition de seuils d’interprétation stables au cours du temps. Nous avons ensuite validé ce protocole opératoire par comparaison à la microlymphocytotoxicité. Au total, 326 échantillons ont été analysés. Avec 99 % de concordance entre les techniques et l’absence de faux négatifs et de faux positifs, nos résultats illustrent la fiabilité d’une technique cytofluorimétrique plus adaptée au fonctionnement d’un laboratoire d’immunologie de routine que les techniques de référence. Ces dernières restent néanmoins nécessaires pour les rares prélèvements trouvés douteux (< 1 %) en cytofluorimétrie. Par analogie à ce travail de standardisation en cytofluorimétrie, d’importants développements en immunologie cellulaire clinique peuvent être envisagés pour les années à venir.