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Annales de Biologie Clinique

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Étude d’un nouveau fixateur pour l’analyse du protéome tissulaire Volume 66, numéro 4, Juillet-Août 2008

Auteurs
Laboratoire de biologie cellulaire et hormonale, Hôpital Arnaud de Villeneuve, CHU de Montpellier, Laboratoire d’oncoprotéomique clinique, CRLC Val d’Aurelle, Montpellier, Département de pathologie, Institut Claudius Regaud, Toulouse, Université de Montpellier I, Montpellier

Les banques de tissus sont habituellement constituées d’échantillons fixés en formaldéhyde (formol) et inclus en paraffine. Bien que le formol permette une conservation histomorphologique des tissus tout à fait correcte, cette molécule réagit préférentiellement avec les fonctions -NH2 libres des protéines pour former des ponts méthylènes intra et intermoléculaires rendant les études protéomiques sur ces tissus incertaines. Nous avons évalué la qualité de conservation des protéines extraites de tissus fixés à l’aide d’un nouveau fixateur par plusieurs approches protéomiques. Par électrophorèses mono et bidimensionnelles, les profils protéiques des tissus fixés par ce nouveau fixateur sont identiques à ceux obtenus avec les tissus congelés. Par western blot, la détection de protéines de différentes localisations cellulaires est également similaire quel que soit le mode de conservation utilisé. Enfin, par immunohistochimie, aucune modification des sites antigéniques ou de la structure des tissus n’est retrouvée en présence de ce nouveau fixateur. L’ensemble de ces résultats permet de présenter ce fixateur comme un compromis intéressant entre les exigences d’une réalisation des examens d’anatomopathologie et la mise en place d’études du protéome tissulaire.