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Annales de Biologie Clinique

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Détermination de la taille des isoformes de l’apolipoprotéine (a). Intérêts et limites du phénotypage par électrophorèse en gel d’agarose à haute résolution Volume 56, numéro 1, Janvier - Février 1998

Auteurs

Des méthodes très résolutives par électrophorèse en gel d’agarose suivie d’une révélation immuno-enzymatique ont été récemment mises au point pour la mesure de la taille des isoformes de l’apolipoprotéine (a). Malgré la grande sensibilité de ces méthodes, un certain nombre d’isoformes ne sont pas détectées. Nous avons comparé l’aptitude de quatre anticorps primaires à détecter les isoformes, et avons trouvé une réactivité identique quelle que soit la taille de l’apolipoprotéine (a). La comparaison des résultats du phénotypage avec ceux du génotypage a permis de mettre en évidence 15 bandes artéfactuelles : toutes ces bandes avaient une faible intensité et n’étaient visibles que lorsque la quantité de lipoprotéine (a) déposée sur le gel dépassait 50 ng. La visualisation des isoformes a été réalisée au moyen d’un substrat luminescent après marquage de l’apolipoprotéine (a) avec un anticorps couplé la peroxydase. De cette façon, il est possible de quantifier l’expression relative de chaque isoforme par densitométrie. Il n’existe pas à l’heure actuelle de standardisation pour la nomenclature des isoformes de l’apolipoprotéine (a) : nous proposons une procédure qui utilise un étalon du commerce pour exprimer les résultats en nombre de kringles.