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Dépistage des hyperhomocystéinémies modérées : adaptation d’une technique par chromatographie liquide |
Annales de Biologie Clinique. Volume 55, Numéro 6, 619-22, Novembre - Décembre 1997, Pratique quotidienne
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Article gratuit
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Auteur(s) : C. Philippe-Bourgeois, H. Levesque, B. Maitrot |
Résumé : La concentration plasmatique en homocystéine dépend de l'équilibre entre synthèse cellulaire hépatique, métabolisme, reméthylation (figure 1) et libération dans le compartiment extracellulaire. La synthèse est de 20 mmoles par jour et seulement 10 µmoles par litre circulent dans le plasma. Dans le plasma, 70 % de l'homocystéine est lié à l'albumine, la fraction non liée minoritaire se compose d'homocystéine libre pour une très faible partie et essentiellement de dimères homocystéine-homocystéine (homocystine) et homocystéine-cystéine. La concentration très faible d'homocystéine libre, la redistribution des fonctions thiols entre dimères et protéines, imposent de doser l'homocystéine totale plasmatique après réduction des fonctions thiols [3].
Diverses anomalies du métabolisme de l'homocystéine, héréditaires ou acquises, impliquant enzymes ou cofacteurs (tableau 1), conduisent à l'accumulation d'homocystéine, responsable de lésions vasculaires artérielles ou veineuses [1, 2]. Dans le cas de certains déficits enzymatiques partiels, un test de charge en méthionine par voie orale (0,1 mg/kg) est nécessaire, le pic de méthionine est atteint en une heure suivi d'une augmentation de l'homocystéine totale dont le maximum se situe entre 4 et 6 h.
Le dépistage des hyperhomocystéinémies modérées, facteur de risque cardiovasculaire, nécessite des méthodes d'analyse sensibles. Plusieurs techniques chromatographiques ont été décrites, associées à différents types de détection : radioenzymatique, fluorimétrique et électrochimique.
La technique utilisée [4] est une chromatographie liquide avec détection fluorimétrique après marquage des fonctions thiols par un composé fluorescent : le SBD-F (ammonium-7-fluoro-2-benzo-2-oxa-1,3-diazole-4-sulfonate). |
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