Screening of infectious microorganisms in blood banks in Douala (1995-2004)

ARTICLE

Auteur(s) : Martin Luther Koanga Mogtomo, Sylvie Louandji Fomekong, Honoré Fotso Kuate, Annie Ngono Ngane

Département de biochimie Faculté des sciences Université de Douala BP 24157 Douala Cameroun

En Occident, les risques transfusionnels liés aux maladies infectieuses transmissibles par le sang peuvent être minimisés par : une sélection appropriée des donneurs, la promotion des dons altruistes volontaires répétés, l’amélioration des contrôles sérologiques et la réduction des transfusions par application des standards en vigueur dans la pratique médicale [1]. Dans ces pays où, les dépistages des maladies infectieuses sont systématiques, il y a un risque potentiel de transmission des infections virales, lié principalement à des dons réalisés pendant la période sérologiquement muette dite « de fenêtre sérologique », peu après l’infection, quand les anticorps ne sont pas encore détectables [2, 3]. La détermination de ce risque est assujettie au suivi des donneurs réguliers séronégatifs afin d’estimer l’incidence des séroconversions, à l’analyse de la période fenêtre pour chaque méthode spécifiquement utilisée pour le dépistage des agents infectieux et dans l’étude des cas cliniques survenus après la transfusion [4]. Malheureusement, aucune de ces approches n’est possible au Cameroun en général et dans la ville de Douala en particulier, car il n’y a aucun suivi des donneurs de sang ou des transfusés, et la majorité des donneurs sont soit des parents, soit des amis du patient et non des donneurs bénévoles réguliers [5, 6]. L’absence de registre national ne permet pas une évaluation des séroconversions. Seule une analyse rétrospective des dons et des donneurs de sang, des techniques et méthodes de dépistage permettrait d’estimer le risque potentiel de transmission des maladies infectieuses transmissibles par transfusion sanguine. C’est pourquoi, il nous est apparu important d’évaluer l’évolution de leur prévalence pour la période de 1995 à 2004 chez les donneurs de sang de la ville de Douala dans deux populations distinctes de donneurs de sang. Cette étude porte essentiellement sur la détection des agents infectieux suivants : virus de l’immunodéficience humaine (VIH), de l’hépatite B (VHB), de l’hépatite C (VHC), de Treponema pallidum et de Plasmodium falciparum, dans les poches de sang des donneurs. La séroprévalence des infections à VIH, VHB, VHC, tréponème pâle et P. falciparum a été déterminée par rapport au nombre total de donneurs prélevés. Une analyse comparative a été ensuite réalisée. Entre les deux sites de collecte de sang, l’analyse des résultats montre que le risque potentiel d’infection par transfusion sanguine reste très élevé.

Matériels et méthodes

Sites et populations d’étude

• – être physiquement bien portant ;
• – ne présenter aucun signe clinique d’infection.

La population des donneurs de sang est constituée de personnes majeures, des deux sexes, donneurs volontaires ou occasionnels, amenés par les familles, ayant donné leur consentement éclairé par écrit. Dans l’ensemble, ils ne présentent aucun signe clinique d’infection. Cette étude a obtenu l’autorisation du comité d’éthique des études cliniques de l’université.

Méthodes

• – la sérologie du VIH est réalisée avec le kit Vidas HIV Duo Quick (Biomérieux SA, France). C’est un test de dépistage de l’infection à VIH, automatisé sur les instruments Vidas, permettant la détection combinée des immunoglobulines totales anti-VIH-1 (groupe M et O) et anti-VIH-2 et de l’antigène p24 du VIH-1 dans le sérum ou le plasma humain par la technique ELFA (Enzyme-Linked Fluorescent Assay) ;
• – les sérologies de l’hépatite B et C ont été réalisées selon les techniques décrites par plusieurs auteurs [7-11] ;
• – la sérologie du tréponème pâle a été réalisée avec le kit SERODIA-TP-PA de Fujirebio Inc. dont la technique est décrite par Deguchi et al. [12, 13] ;
• – paludisme : le dépistage de porteurs asymptomatiques de P. falciparum dans la population a été fait par l’examen au microscope de frottis mince et d’une goutte épaisse colorés par le Giemsa. L’espèce plasmodique a été identifiée sur le frottis, la densité parasitaire sur goutte épaisse est déterminée selon la formule retenue par l’Organisation mondiale de la santé (OMS) pour la chimiosensibilité [14].

Résultats

Première étude : séroprévalence sur 2 674 donneurs de sang, étudiants de l’université de Douala

Généralités de la cohorte de l’hôpital Laquintinie

Prévalence de l’infection à Plasmodium

Prévalence des marqueurs sérique de la syphilis

Séroprévalence du VIH 1+2 dans la cohorte

Séroprévalence des hépatites B et C

Discussion

Les infections parasitaires, en revanche, ne font pas l’objet d’un dépistage systématique. Les résultats obtenus ont été certainement influencés par l’absence d’un système de contrôle de qualité et par la pratique routinière des tests de dépistages sérologiques à la banque de sang. Ces paramètres peuvent affecter l’estimation des risques potentiels de transfusion du sang entier et des fractions de sang infectées. Le risque de recrutement devrait être spécifiquement étudié en fonction des diverses populations concernées par la transfusion : en particulier s’il s’agit de femmes enceintes ou d’enfants, le risque à transfuser des poches non dépistées est différent de celui à transfuser des adultes en général.

Les résultats présentés mettent en lumière non seulement la problématique de la sécurité de la transfusion sanguine, mais également son importance dans un système de santé par les données qu’elle peut apporter sur la prévalence des différents types de donneurs.

En effet, la proportion des poches de sang testées positives pour les agents infectieux est en moyenne de 4,28, 11,47, 1,32 et 9,18 % respectivement pour le VIH, HBV, HCV et la syphilis pour les donneurs de l’université de Douala sur la période 1995-2003. L’échantillonnage de l’hôpital Laquintinie montre une séroprévalence de 7,89, 6,91, 2,32 et 7,90 % respectivement pour le VIH-1/2, VHB, VHC et la syphilis.

Il faudrait prendre en considération la problématique du risque d’infection virale pendant la période « fenêtre », quand les anticorps ne sont pas détectables même avec 100 % de donneurs dépistés. La période fenêtre actuelle considérée par la plupart des tests de dépistage est de 22, 39 et 12 jours respectivement pour le VIH, le VHB et le VHC [17-20] à condition d’utiliser des réactifs combinés dépistant antigènes et anticorps et qui permettent un gain considérable dans le raccourcissement de la fenêtre sérologiquement muette (Monalisa AgHBs Ultra de Biorad présente une fenêtre de 39 jours, HCV Monalisa, HCV Combo AgAc de Biorad ou Murex Combo HCV d’Abbott, la fenêtre est de 12 à 15 jours). Par ailleurs, la transmission pendant la période fenêtre ne peut être estimée qu’avec l’étude des séroconversions des donneurs et des transfusés [15-20]. Le risque est, par ailleurs, accru par le fait que très peu de donneurs sont bénévoles : 5 % environ contre 95 % d’occasionnels, mais souvent fortement sollicités, car faisant partie de la famille du receveur chez lesquels les facteurs de risques sont méconnus ou inavoués.

Le risque de transmission du P. falciparum est très souvent sous-estimé. En effet, 12,83 % des donneurs de l’hôpital Laquintinie sont infectés. Cette parasitémie constitue un risque potentiel de contamination des receveurs. Le risque du paludisme transfusionnel est d’autant plus élevé, qu’il n’est pas fonction de la densité parasitaire. Une parasitémie de 100 parasites par microlitre considérée comme faible représente pour le receveur transfusé avec 500 mL de sang, un inocula d’environ 50 000 000 parasites, plus souvent pathogène chez un sujet déficient. Le paludisme post-transfusionnel est très imprévisible et survient chez des patients déjà affaiblis par la maladie [21, 22]. Par conséquent, une surveillance plus accrue devrait permettre de pouvoir transfuser du sang et des dérivés sanguins exempts de toute infection.

Le problème de la fenêtre sérologique pour le VIH, VHB et VHC peut être désormais pris en compte, grâce au progrès de la biologie moléculaire et son automatisation. Après l’organisation d’une sélection réglementée et performante de donneurs, la structuration d’un suivi de donneurs bénévoles réguliers, répondant à des questionnaires stricts, et à une prévalence très faible des marqueurs viraux et des dépistages avec des réactifs combinés ; alors, on pourra lancer la détection des acides nucléiques dans le plasma ou le sérum, qui, pour quelques cas, permettraient d’identifier une primo-infection avant l’émergence des anticorps. Sur le plan local, l’importance de la transfusion sanguine et en particulier les risques de transmission des maladies infectieuses sont de plus en plus intégrés dans les politiques de santé publique, notamment par des lois réglementant ce secteur délicat et particulier [23]. La mise en œuvre de ces mesures devrait à terme permettre d’optimiser la qualité et la sécurité transfusionnelle au Cameroun et pourquoi pas la certification du sang et ses produits dérivés destinés à la transfusion.

Remerciements

Références

2 Lackritz EM, Satten GA, Aberle-Grasse J. Estimated risk of transmission of the human immunodeficiency virus by screened blood in the United State. N Eng J Med 1995 ; 333 : 1721-5.

3 Screiber GB, Busch MP, Kleinman SH, Korelitz JJ. The risk of transfusion-transmitted viral infections. N Eng J Med 1996 ; 334 : 1685-90.

4 Bush MP. Incidence of infectious disease markers in blood donors, implications for residual risk of viral transmission by transfusion. Program and abstract of the National Institutes of Health Development Conference. January 9-11 1995, Bethesda (MD); National Institutes of Health.

5 Pan American Health Organization. Blood bank situation in Latin America in 1996: serological markers for communicable diseases in blood donors. Epidemiol Bull 1998 ; 19 : 12-4.

6 Third Meeting of the task Force on surveillance for Emerging and Re-Emerging Infectious diseases. 16-17 November 1998, Mexico city, Mexico, PAHO/HCP/HCT/141/99.

7 Jolivet-reynaud C, Lesenechal M, O’Donnel B. Localization of hepatite B surface antigen epitopes present on variants and specifically recognised by anti-hepatite B surface antigen monoclonal antibodies. J Med Virol 2001 ; 65 : 241-9.

8 Aldershvile J, Frösner GG, Neilsen JO. Hepatite B antigen and antibody measured by radioimmunoassy in acute hepatitis B surface antigen positive hepatitis. J Inf Diseases 1980 ; 141 : 293-8.

9 Nasoff MS, Zebedee SL, Inchauspe G, Prince AM. Identification of an immunodominant epitope within the capsid protein of hepatis C virus. Proc Natl Acad Sci USA 1991 ; 88 : 5462-6.

10 Ching WM, Wychowsky C, Beach MJ, et al. Interaction of immune sera with synthetic peptides corresponding to the structural protein region of hepatis C virus. Proc Natl Acad Sci USA 1992 ; 89 : 3190-4.

11 Couruce AM, Le Marrec N, Girault A, Ducamp S, Simon N. Anti-hepatitis C virus (anti-HCV) seroconversion in patients undergoing hemodialysis: comparison of second and third generation anti-HCV assays. Transfusion 1994 ; 34 : 790-5.

12 Deguchi M, Hosotsubo H, Izumi Y, Ohmine T, Amino N, Miyai K. Measurement of anti-treponema pallidium antibodies using a new artificial carrier, high-density composite particles (HDP). Medicine and Pharmacy 1991 ; 26 : 333-9.

13 Farshy CE, Hunter EF, Larsen SA, Cerny EH. Double-conjugate enzyme-linked immunosorbent assay for immunoglobulins G and M against Treponema pallidum. J Clin Microbiol 1984 ; 20 : 1109-13.

14 Organisation mondiale de la santé (OMS), Division de la lutte contre les maladies ; Deguchi M, Hosotsubo H, Asari S, Yamashita N, Ohmine T, Amino N. 1993. Measurement of anti-Treponema pallidium antibodies by the indirect agglutination reaction and clinical application. Jarman.tropicales : évaluation de l’efficacité thérapeutique des antipaludiques pour le traitement du paludisme à Plasmodium falciparum non compliqué. WHO/MAL 96. Genève : OMS, 1993.

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18 Vrielink H, Reesink PJ, Van den Burg PJM, et al. Performance of three generation of anti-hepatitis C virus enzyme-linked immunosorbent assays in donors and patients. Transfusion 1997 ; 37 : 847-9.

19 Aach RD, Stevens CE, Hollinger FB, et al. Hepatitis C virus infection in post-transfusion hepatitis: an analysis with first-and second-generation assays. N Engl J Med 1991 ; 325 : 1325-9.

20 Monteux F, Bouquillon J, Mbass JR, Aurenche, Guévart E. Urgence transfusionnelle et risque VIH en milieu rural du Nord Cameroun. Med Trop 2002 ; 62 : 283.

21 Guiguemde TR, Sanou MA, Ouedrago JB, Coulibaly N, Ghary AR, Coulibaly SO. Le paludisme et la transfusion, une étude portant sur les donneurs de la banque de sang de l’hôpital de Bobo-Dioulasso (Burkina Faso). Malaria 1995 ; 2 : 35-8.

22 Kinde G, Oke J, Gnahoui I, Massoughodji A. Le risque de paludisme transfusionnel à Cotonou, Bénin. Santé 1998 ; 10 : 389-92.

23 Loi cadre régissant la transfusion sanguine au Cameroun, n^o 2004/014 du 22 décembre 2003. Journal officiel du Cameroun, numéro 1 ; janvier 2004.