Author(s) : Marc G. DENIS, Laboratoire de biochimie spécialisée et Inserm U. 539, institut de biologie, 9, quai Moncousu, 44093 Nantes Cedex..
Pictures
Figure 1.Principe
de la PCR quantitative en temps réel. L'amplification
d'un fragment de la beta2-microglobuline a été réalisée
sur des dilutions successives d'un échantillon d'ADNc : 1) dilution
1/20 ; 2) dilution 1/100 ; 3) dilution 1/500 ; 4) dilution 1/2 500. À
l'issue de 35 cycles d'amplification, les échantillons ont été
analysés par électrophorèse sur gel d'agarose coloré
au bromure d'éthidium (A). Au cours de cette amplification,
la fluorescence a été mesurée à l'issue de chaque
cycle d'amplification (B). Le Ct (cycle seuil ou cycle threshold)
de chaque échantillon est inversement proportionnel au logarithme
de sa concentration (C).
Figure 2.Les principaux systèmes utilisés
pour générer de la fluorescence au cours de l'amplification
: le SYBR GreenTM (A et B), les sondes d'hydrolyse (C et D),
les sondes d'hybridation (E et F). Les schémas illustrent
ce qui se passe dans chaque système en l'absence (A, C
et E) ou en présence (B, D et F) de
produit d'amplification.
Printable version
